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不同溶劑類型與溶劑強(qiáng)度對分離的影響

2022-11-10

色譜分離中,影響選擇性和分離的因素有很多,其中流動相中的有機(jī)溶劑類型以及不同的溶劑強(qiáng)度就是影響因素之一。對于反相色譜模式,常用的有機(jī)溶劑有甲醇、乙腈、四氫呋喃等,我們可以通過改變流動相中有機(jī)相種類或調(diào)整其比例,來改變選擇性和分離度,以呈現(xiàn)出不同的分離效果。

應(yīng)用實(shí)例

4-(氯甲基)苯甲酸&3-(氯甲基)苯甲酸的分離

結(jié)構(gòu)如圖所示:

微信截圖_20221110150439.png

兩種物質(zhì)為間位與對位異構(gòu)體,在乙腈體系下無法實(shí)現(xiàn)完全分離。改變有機(jī)相種類后,可實(shí)現(xiàn)較好分離。

色譜條件1

色譜柱:Ultimate? XS-C18 4.6*250mm,5μm

流動相:0.1%磷酸水和乙腈,梯度洗脫

微信截圖_20221110150513.png

分析:兩目標(biāo)峰有分離趨勢,但分離不完全,將梯度調(diào)整成等度條件。

色譜條件2

色譜柱:Ultimate? XS-C18 4.6*250mm,5μm

流動相:0.1%磷酸水/乙腈=70/30

微信截圖_20221110150519.png

分析:分離有改善,但還是無法分離完全,且依靠調(diào)整溶劑強(qiáng)度已無法改善其分離。

色譜條件3

在該色譜柱柱上進(jìn)行方法優(yōu)化,用甲醇替換乙腈,再次進(jìn)行測試

色譜柱:Ultimate? XS-C18 4.6*250mm,5μm

流動相:0.1%磷酸水/甲醇=60/40

微信截圖_20221110150523.png

結(jié)果:兩目標(biāo)物峰型良好,且可實(shí)現(xiàn)完全分離。

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